Среда Амниокар, 100 мл, евро-ПЭТ
Среда"Амниокар" по ТУ 20.59.52-017-45171785-2016
Представляет собой готовую к применению питательную среду. В составе Среды «Амниокар» присутствует стандартизированная стерильная сыворотка крови эмбриональная телячья и антибиотики (бензилпенициллина натриевая соль). Среда производится в асептических условиях и стерилизуется методом мембранной фильтрации через фильтры с размером пор 0,22 мкм.
Препарат: После размораживания и перемешивания – прозрачная жидкость красновато-оранжевого цвета без опалесценции и выраженного осадка.
Назначение: Среда предназначена для использования в лечебно-профилактических, диагностических и научно-исследовательских учреждениях с целью культивирования клеток амниотической жидкости и клеточных элементов хориона in vitro методами «In situ» и «Flask» для получения обогащённой популяции делящихся клеток и последующего цитогенетического анализа метафазных хромосом; также может быть применена в целях культивирования фибробластов, мезенхимальных стволовых клеток (МСК) и других клеток мезенхимального происхождения.
Способ применения:
- Все процедуры проводить в асептических условиях;
- Разморозить среду в холодильной камере при температуре от +2 до +8 °C (не допускать ускоренного оттаивания);
- После оттаивания аккуратно перемешать содержимое флакона;
- Центрифугировать 10 мл амниотической жидкости при 1000 об/мин. в течение 10 мин.;
- Слить супернатант, оставить 1–2 мл надосадочной жидкости;
- Ресуспендировать клеточный осадок, добавить 5 мл среды, перемешать и перенести в культуральный флакон (25 см²);
- Культивировать 9–12 суток при 37 ± 0,5 °C, 5% СО₂;
- На 5-е сутки добавить половину объёма свежей среды;
- Для остановки митоза обработать клетки колхицином (1 мкг/мл, 60 мин.)*;
- Снять клетки с пластика и обработать по стандартным методикам: центрифугирование, гипотония, фиксация, приготовление и окраска препаратов.
*Остановка митотического деления с последующим накоплением метафазных пластин достигается инкубацией клеток с колхицином. Для анализа клетки переводят в гипотонический раствор хлористого калия, фиксируют, наносят на предметное стекло и окрашивают, согласно общепринятым методикам.
Условия хранения: Хранить в защищённом от света месте при температуре от –20 до –10 °C.
