Коллагеназа (тип 4), нестерильная, 1 г, Gibco
Коллагеназа – ферментный препарат, получаемый из бактерий Clostridium histolyticum, расщепляющий связи между нейтральными аминокислотами и глицином в последовательности Про-Х-Гли-Про (характерной для коллагена). Обладает способностью расщеплять коллагеновые фибриллы соединительной ткани (кожи, костей, сухожилий, сосудов).
Препарат: Лиофилизированный порошок бурого цвета. При растворении образует мутный бурый раствор. Для обработки разных тканей используются разные типы коллагеназы. IV тип – для островков Лангерганса.
Назначение: Используется в качестве диссоциирующего агента при лабораторных исследованиях для расщепления тканей на отдельные клетки. Применяется при культивировании клеток опухолей человека, клеток почки мышей, нервных клеток мозга и многих других (кроме эпителиальных). Воздействие на клетки относительно мягкое, так как фермент работает при физиологической температуре и pH, не требует специального оборудования.
Способ применения: Растворить лиофилизат в растворе Хэнкса. Стерилизовать фильтрацией (0,22 мкм). Хранить и применять в асептических условиях. Обычно используют концентрации 0,1–0,5 % или 50–100 ед/мл. Для диссоциации ткани: измельчить ткань, промыть в растворе Хэнкса, внести раствор коллагеназы. Инкубировать при 37 °C, рекомендуется добавление 3 мM CaCl₂ для улучшения диссоциации. Для перфузии органов добавлять коллагеназу при 37 °C. Диспергированные клетки отделить от крупных фрагментов через стерильную сетку.
Условия хранения: Хранить при температуре от 2 до 8 °C в защищенном от света месте. Транспортировать всеми видами крытого транспорта (допускается перевозка при комнатной температуре). Избегать вдыхания и контакта с кожей.
