Сухая среда DМЕМ без глутамина, фенолового красного и бикарбоната Na, c содержанием глюкозы 4,5 г/л и HEPES, на 50 л
Представляет собой сухую смесь неорганических солей, аминокислот, витаминов, глюкозы и фенолового красного для приготовления раствора. В состав добавлен HEPES в концентрации 25 мМ, что обеспечивает повышенную буферную ёмкость и более стабильный уровень рН в процессе культивирования клеток. Требует дополнительного введения бикарбоната натрия.
Препарат: Порошок от белого до светло-жёлтого цвета, умеренно растворим в воде.
Назначение: Среда предназначена для культивирования широкого спектра клеток животных и человека. Высокое содержание глюкозы делает её пригодной для метаболически активных и быстро пролиферирующих линий. Буфер HEPES обеспечивает устойчивость рН при изменении условий культивирования, что особенно важно при работе вне CO₂-инкубаторов (например, при транспортировке, микроскопии или работе в открытых системах). Среда может применяться как основа для бессывороточных и адаптированных сред.
Способ применения:
1. Для проведения стерильных работ вскрывать пластиковую банку в асептических условиях;
2. Необходимо отмерить 90% от общего объёма воды комнатной температуры для клеточных культур. Осторожно перемешивая, медленно ввести предварительно подготовленную навеску сухой среды. Не нагревать, размешивать до полного растворения;
3. Добавить навеску бикарбоната натрия и глутамина*;
4. После полного растворения всех компонентов необходимо измерить рН раствора. Для корректировки рН используйте растворы 1Н HCl или 1Н NaOH культуральной чистоты. При достижении необходимого рН, довести раствор до конечного объёма, осторожно перемешать, измерить рН готовой среды**;
5. После приготовления раствор подвергается стерилизации через фильтр с размером пор 0,2 мкм или 0,1 мкм. Асептически разливается в стерильную, герметичную тару.
Условия хранения: Хранить при температуре +2...+8 °C в сухом, защищённом от света месте. Не допускать попадания влаги внутрь упаковки. Транспортировать всеми видами крытого транспорта.
*При длительном хранении глутамин в растворе деградирует, поэтому его можно добавлять стерильным непосредственно перед применением среды. Также можно использовать стабильный аналог глутамина – аланил-глутамин (кат. № Ф102626 или Ф005).
**Обратите внимание: после фильтрации рН среды возрастает на 0,1–0,2 ед.
