Сухая среда DMEM/F-12 без глутамина и бикарбоната Na, на 50 л
Представляет собой сухую смесь неорганических солей, аминокислот, витаминов, глюкозы и фенолового красного для приготовления раствора. Требует дополнительного введения бикарбоната натрия. Cреда DMEM/F-12 – это смесь питательных сред DMEM и F-12 в соотношении 1:1, но готовится из отдельных компонентов.
Препарат: Порошок от жёлтого до красноватого цвета, умеренно растворим в воде.
Назначение: Среда используется для культивирования широкого спектра клеток животных и человека, включая эпителиальные клетки, фибробласты, гибридомы, стволовые клетки, а также клетки поджелудочной железы (например, INS-1, MIN6). Часто применяется в качестве основы для создания бессывороточных и специализированных сред, в том числе в системах 3D-культивирования и органоидинальных культурах. Повышенное содержание питательных веществ делает её подходящей для длительного культивирования и быстропролиферирующих клеток.
Способ применения:
1. Для проведения стерильных работ вскрывать пластиковую банку в асептических условиях;
2. Необходимо отмерить 90% от общего объёма воды комнатной температуры для клеточных культур. Осторожно перемешивая, медленно ввести предварительно подготовленную навеску сухой среды. Не нагревать, размешивать до полного растворения;
3. Добавить навеску бикарбоната натрия и глутамина*;
4. После полного растворения всех компонентов необходимо измерить рН раствора. Для корректировки рН используйте растворы 1Н HCl или 1Н NaOH культуральной чистоты. При достижении необходимого рН, довести раствор до конечного объёма, осторожно перемешать, измерить рН готовой среды**;
5. После приготовления раствор подвергается стерилизации через фильтр с размером пор 0,2 мкм или 0,1 мкм. Асептически разливается в стерильную, герметичную тару.
Условия хранения: Хранить при температуре +2...+8 C в сухом, защищённом от света месте. Не допускать попадания влаги внутрь упаковки. Транспортировать всеми видами крытого транспорта.
*При длительном хранении глутамин в растворе деградирует, поэтому его можно добавлять стерильным непосредственно перед применением среды. Также можно использовать стабильный аналог глутамина – аланил-глутамин (кат. № Ф102626 или Ф005).
**Обратите внимание: после фильтрации рН среды возрастает на 0,1–0,2 ед.
